Immunologiczne i funkcjonalne różnice pomiędzy czynnikami stymulującymi wzrost kolonii człowieka typu I i II.

Dwa różne typy czynników stymulujących kolonię (CSF) zostały ostatnio opisane w ludzkich tkankach i hodowanych liniach komórkowych. Antysurowice do oczyszczonego typu I i II CSF przygotowano u królików. Przeciwciało anty-CSF I hamuje CSF I, ale nie ma wpływu na CSF II. Hamuje krzyżowo CSF I z kilku innych ludzkich źródeł, ale nie hamuje CSF z mysich płuc lub mysich komórek L. Przeciwciało anty-CSF II hamuje aktywność CSF II, ale nie ma wpływu na CSF I. Stwierdzono radioimmunologiczny test na CSF I. Test kompetycyjnego wiąza...

Inicjacyjna mutacja kodonu (AUG ---- GUG) ludzkiego genu alfa1-globiny. Charakterystyka strukturalna i dowód łagodnego fenotypu talasemicznego.

alfa-globina jest kodowana przez dwa sąsiadujące geny, alfa 1 i alfa 2. Najnowsze dowody sugerują, że geny te nie są jednakowo eksprymowane i że gen alfa 2-globiny koduje większość alfa-globiny. To odkrycie mogłoby przewidywać, że mutacja talasemiczna genu alfa-2-globiny doprowadziłaby do poważniejszej utraty syntezy łańcucha alfa niż podobna mutacja genu alfa1-globiny. W poprzednim badaniu opisaliśmy defekt alfa-talasemii niedegetacyjnej w genie alfa-2-globiny, wynikający z mutacji kodonu inicjacji AUG ---- ACG. W niniejszym ...

9 alfa, 11 beta-prostaglandyny F2, nowy metabolit prostaglandyny D2, jest silnym agonistą kurczącym się dróg oddechowych człowieka i świnki morskiej.

Prostaglandyna (PG) D2, dominujący prostanoid uwolniony z aktywowanych komórek tucznych u ludzi, jest początkowo metabolizowany przez redukcję funkcji ketonowej C-11, dając 9 alfa, 11 beta-PGF2. W tym badaniu porównano działanie dróg oddechowych 9 alfa, 11 beta-PGF2 z epimem 9 alfa, 11 alfa-PGF2 (PGF2 alfa) i PGD2. 9 alfa, 11 beta-PGF2 był silnym agonistą skurczowym wyizolowanych tchawicy świnki morskiej i 4-mm ludzkich dróg oddechowych in vitro; mocy PG w stosunku do PGD2 (= 1,00) wynoszą 0,65 (NS) i 4,08 (P mniej niż 0,001) dla 9...

Lipoproteina małpy Rhesus (a) wiąże się słabiej niż lizyna Sepharose i U937 z komórkami monocytoidalnymi niż ludzka lipoproteina (a). Dowód na dominującą rolę kringle 4 (37).

Lipoproteina rezusa (a) (Lp [a]) wiąże się mniej wydajnie niż ludzka Lp (a) z lizyną-Sepharose i hodowanymi komórkami U937. Badania z wykorzystaniem fragmentów plazminogenu pochodnych elastazy wykazały, że w tych interakcjach nie wymaga ani kringle 5, ani domeny proteazy Lp (a), co wskazuje na zaangażowanie regionu K4. Porównawcze analizy strukturalne zarówno ludzkiej, jak i małpiej apo (a) domeny K4, wraz z badaniami modelowania molekularnego, poparły wniosek, że K4 (37) odgrywa dominującą rolę w funkcji wiązania lizyny apo (...

Najnowsze zdjęcia w galerii 50zhpmokotow:

Interleukina-10 moduluje ekspresję genów kolagenu typu I i metaloproteazy macierzy w hodowanych fibroblastach ludzkiej skóry.

IL-10, pierwotnie wyizolowana z komórek T pomocniczych myszy, jest cytokiną o funkcjach regulacyjnych na wielu interleukinach. W tym badaniu pokazujemy, że rekombinowana ludzka IL-10 wpływa na ekspresję kilku genów zaangażowanych w syntezę macierzy pozakomórkowej i przebudowę w ludzkich kulturach fibroblastów skóry. Jak oceniano w analizach Northern blot, ekspresja genów kolagenu typu I była obniżona, podczas gdy ekspresja genu kolagenazy i genu stromelizyny była znacznie wzmocniona przez IL-10. Nie stwierdzono wpływu na tkankow...

Angiotensynogen jako czynnik ryzyka pierwotnego nadciśnienia tętniczego w Japonii.

Popularny molekularny wariant angiotensynogenu (AGT), prekursora silnego wazoaktywnego hormonu angiotensyny II, został obciążony jako marker genetycznej predyspozycji do nadciśnienia tętniczego u osób rasy kaukaskiej (Jeunemaitre, X., F. Soubrier, YV Kotelevtsev, RP Lifton , CS Williams, A. Charru, SC Hunt, PN Hopkins, RR Williams, JM Lalouel i P. Corvol., 1992. Celi 71: 169-180). Obecnie pokazujemy, że ten sam wariant, T235, jest związany z nadciśnieniem tętniczym pierwotnym u japońskich pacjentów. Obserwacja tego związku w odrębn...

Wpływ cytotoksycznych leków immunosupresyjnych na limfocyty wrażliwe na tuberkuliny u świnek morskich.

Aktywność immunosupresyjna dwóch leków specyficznych dla fazy, 6-merkaptopuryny (6-MP) i metotreksatu oraz czynnika specyficznego dla cyklu, cyklofosfamidu, oceniano na składniku limfocytarnym o stwierdzonej nadwrażliwości tuberkulinowej u świnek morskich. U tych zwierząt, limfocyty wrażliwe na pochodną białek (PPD) znajdują się w fazie intermitotycznej cyklu proliferacyjnego. Ani lek specyficzny dla fazy znacząco zmieniał liczbę lub czynności funkcjonalne tych limfocytów. Według dwóch kryteriów in vitro, limfoproliferacji ...

Bezpośrednie zapisy temperatury w drzewie tracheoskronowym u normalnego człowieka.

W celu ustalenia, jak głęboko wdychane powietrze może przedostać się do dróg oddechowych przed doprowadzeniem do warunków ciała, zmierzyliśmy temperaturę w drogach oddechowych przedniego odcinka podstawnego prawego dolnego płata u pięciu normalnych osobników, podczas gdy oni oddychali powietrzem w temperaturze poniżej zera i warunki otoczenia. Podczas spokojnego oddychania większość ogrzewania dostarczanego gazu odbywała się w górnych drogach oddechowych zgodnie z oczekiwaniami. Jednak wraz ze wzrostem obciążenia termiczneg...

Hemoglobina Mississippi (beta 44ser ---- cys). Badania fenotypu talasemicznego w mieszanej heterozygoty z beta-talasemią.

Hemoglobina Mississippi (HbMS: beta 44ser ---- cys) ma anomalne właściwości, które obejmują wiązania dwusiarczkowe z normalnymi łańcuchami beta-, delta, gamma i alfa, oraz tworzenie multimerów o wysokiej masie cząsteczkowej. Podczas gdy heterozygoty dla HbMS są klinicznie i hematologicznie normalne, a nosiciele genu beta + - talasemii w naszej rodzinie mają łagodną niedokrwistość mikrocytarną, proband z HbMS-beta + - talasemią ma poziom hemoglobiny równy 7 g / dl, średnią objętość krwinkową (MCV) ) 68 fl, retikulocyty 2-...

Niedobór witaminy D, hipokalcemia i zwiększona degradacja mięśni szkieletowych u szczurów.

Miopatię związaną z niedoborem witaminy D zbadano na szczurach z niedoborem witaminy D i witaminą D. W porównaniu z suplementowaną witaminą D ad lib. lub szczury karmione parą, przyrost masy ciała i masa mięśniowa były zmniejszone u zwierząt hipokalcemicznych z niedoborem witaminy D. Z wyjątkiem niewielkiego obniżenia poziomu fosforanu kreatyny w mięśniach, skład mięśni nie ulegał zmianie z powodu niedoboru witaminy D. Szybkość obrotu białek mięśniowych została określona zarówno w badaniach in vivo, jak i in vitro i ...

Mutacja genu fumarase u dwojga rodzeństwa z postępującą encefalopatią i niedoborem fumarazy.

Zgłaszamy wrodzony błąd cyklu kwasu trójkarboksylowego, niedobór fumarazy, u dwojga rodzeństwa urodzonego przez rodziców pierwszego kuzyna. Przedstawiono postępującą encefalopatię, dystonię, leukopenię i neutropenię. Zwiększenie mleczanu w płynie mózgowo-rdzeniowym i wysokie wydalanie fumaranu z moczem doprowadziło nas do zbadania aktywności łańcucha oddechowego i cyklu Krebsa, a także do ostatecznego zidentyfikowania niedoboru fumaraz u tych dwojga dzieci. Niedobór był głęboki i obecny we wszystkich badanych tkankach, ...

Relaks anafilaktyczny bazofilowej aktywności podobnej do kalikreiny. II. Pośrednik natychmiastowych reakcji nadwrażliwości.

W tym raporcie opisano uwalnianie immunologiczne nowego mediatora z ludzkich leukocytów obwodowych, aktywność podobną do kalafoniny bazowej (BK-A). Proces uwalniania inicjowany jest przez oddziaływanie antygenu na anty-IgE z komórkową IgE i wydaje się być podobny w mechanizmie do relazy histaminy i innych mediatorów bezpośredniej reakcji nadwrażliwości. Relacje dawka-odpowiedź i kinetyka uwalniania histaminy i BK-A z leukocytów obwodowych prowokowanych antygenem są podobne. Reakcja BK-A zależy od wapnia i temperatury, wymaga ene...

Tamoksyfen blokuje kanały chlorkowe. Możliwy mechanizm powstawania zaćmy.

Tamoksyfen jest antyestrogenem często stosowanym w leczeniu raka piersi i obecnie jest oceniany jako profilaktyczny dla osób z wysokim ryzykiem rozwoju nowotworów. Stwierdziliśmy, że tamoksyfen i jego pochodne są blokerami o wysokim powinowactwie do określonych kanałów chlorkowych. Ta blokada wydaje się być niezależna od interakcji tamoksyfenu z receptorem estrogenu i dlatego odzwierciedla alternatywny cel komórkowy. Jednym z klinicznych skutków ubocznych tamoksyfenu jest upośledzenie widzenia i zaćma. Pokazano, że kanały chlor...

Sn-protoporfiryna hamuje wywołaną chemicznie eksperymentalną porfirię wątrobową. Potencjalne implikacje kliniczne.

Zdolność Sn (cyny) -protoporfiryny do hamowania indukcji syntazy wątrobowej delta-aminolewulinianu (ALA) przez alliloizopropyloacetamid (AIA) badano u dorosłego szczura. Dawki Sn-protoporfiryny wynoszące 1, 10 i 50 mumoli / kg masy ciała powodowały zmniejszenie indukowanej przez AIA wątrobowej aktywności syntazy ALA, odpowiednio, o 32, 52 i 60%, w porównaniu ze szczurami leczonymi samą AIA; hamowanie syntazy ALA nie było bezpośrednim efektem Sn-protoporfiryny. To zahamowanie aktywności enzymatycznej w wątrobie znalazło odzwiercie...

Kompleks końcowy dopełniacza C5b-9 stymuluje mitogenezę w komórkach 3T3.

Kompleks dopełniacza błony (MAC) może indukować odwracalne zmiany w przepuszczalności błony komórkowej, powodując znaczące, lecz przejściowe wewnątrzkomórkowe zmiany jonowe przy braku lizy komórek. Ponieważ strumienie jonów i cytosolowe zmiany jonowe są integralnymi etapami kaskady sygnalizacyjnej zapoczątkowanej, gdy czynniki wzrostu wiążą się z ich receptorami, postawiliśmy hipotezę, że indukowane przez MAC odwracalne zmiany przepuszczalności błony mogą stymulować proliferację komórek. Używając oczyszczonych ko...

Rola białek nośnikowych w surowicy w metabolizmie obwodowym i rozmieszczeniu tkankowym hormonów tarczycy w rodzinnej hipertoksyksymii dysbbuminowej i wrodzonym podwyższeniu globuliny wiążącej tyroksynę.

Aby zbadać rolę globuliny wiążącej tyroksynę (TBG) i albuminy w dostępności hormonów tarczycy do tkanek obwodowych, wykonano kompleksowe badania kinetyczne tyroksyny (T4) i trijodotyroniny (T3) u ośmiu osób z rodzinną hipertoksyksemią dysbbuminową (FDH) , u czterech osób z odziedziczonym nadmiarem TBG iu 15 osób zdrowych. U osób z wysokim odsetkiem TBG redukcja klirensu osoczowego T4 i T3 (odpowiednio o 51% i 54%) wiązała się z normalną codzienną produkcją; Objętości dystrybucji T4 i T3 zostały znacznie zmniejszone. U o...

Wadliwe przetwarzanie prekursora insuliny-receptora w hodowlanych limfocytach od pacjenta z ekstremalną opornością na insulinę.

Zbadaliśmy pacjenta z ekstremalną opornością na insulinę, rogowaceniem nerek i zmniejszoną insulinowiążącą erytrocytem. Transformowane EBV limfocyty od tego pacjenta wykazywały znacząco zmniejszone wiązanie insuliny 125I. Radioaktywacja receptorów powierzchniowych komórek, a następnie immunoprecypitacja przeciwciałami antyreceptorowymi ujawniła obecność zwiększonych ilości białka 210 kD, ale nie wykryto podjednostek alfa lub beta. Ciągłe znakowanie 2- [3H] mannozą ujawniło syntezę prekursora 190 kDa i białka 210 kD. ...

Faza I: Badanie czynnika stymulującego wzrost kolonii granulocytów u pacjentów z przejściowym rakiem komórkowym nabłonka dróg moczowych.

Rekombinowany ludzki czynnik stymulujący kolonie granulocytów (rhG-CSF) podawano w dawce 1-60 mikrogramów / kg masy ciała 22 pacjentom z przejściowym rakiem komórek przed chemioterapią w ramach badania fazy I / II. U wszystkich pacjentów obserwowano zależne od dawki zwiększenie bezwzględnej liczby neutrofilów (ANC) o 1,8 - 12-krotnie. Dodatkowo, temu zwiększeniu w ANC towarzyszył wzrost alkalicznej fosfatazy leukocytów, markera tworzenia się wtórnych granulek. U sześciu z ośmiu analizowanych pacjentów zaobserwowano wzrost sto...

Hamowanie in vitro zdolności hamowania elastazy surowicy przez reaktywne formy tlenu wytwarzane przez fagocytowanie leukocytów wielojądrzastych.

Ludzkie leukocyty polimorfojądrowe (PMN), fagocytujące opsonizowane kompleksy antygen-przeciwciało, wytwarzają ulegające dializie rodzaje aktywowanego tlenu, które są zdolne do częściowego hamowania zdolności hamowania elastazy (EIC) całej ludzkiej surowicy lub oczyszczonego ludzkiego inhibitora alfa1-proteinazy. EIC w surowicy był częściowo protologicznie chroniony przez dysmutazę ponadtlenkową, katalazę lub mannitol, co sugeruje, że odpowiedzialny za ten efekt może być rodnik hydroksylowy powstały w wyniku oddziaływania n...

Chromogranina A w prawidłowych i złośliwych tkankach ludzkich.

Wykorzystano rekombinowaną sondę cDNA do ludzkiej chromograniny A do pomiaru ekspresji mRNA kodowanego przez ten gen w różnych prawidłowych tkankach ludzkich i próbkach nowotworowych przy użyciu analizy hybrydyzacji Northern i hybrydyzacji in situ. Z kilkoma wyjątkami ekspresja mRNA chromograniny A wydaje się być ograniczona do prawidłowych tkanek i nowotworów linii neuroendokrynnej. Jednakże wykryliśmy ekspresję mRNA tego genu w 1 z 14 linii komórkowych i 2 z 13 próbek guza gruczolakoraka okrężnicy. Stwierdzenie ekspresji chr...

Naczyniowy transport insuliny do mięśnia sercowego szczura. Centralna rola śródbłonka naczyń włosowatych.

Wykorzystując nienaruszone, bijące serca, oceniliśmy oddziaływanie insuliny ze śródbłonkiem naczyń włosowatych i późniejsze pojawienie się insuliny w mięśniu sercowym. Serca szczurów perfundowano insuliną 125I (10 (-10) M) samodzielnie lub w połączeniu z nieznakowaną insuliną (10 (-9) -10 (-5) M). Ziarno 125I (pokazane jako stanowiące ponad 90% nietkniętej insuliny) nad zarówno kapilarnym śródbłonkiem, jak i mięsień sercowy zmniejszyły się w sposób zależny od dawki, gdy serca były współwykończone znakowaną in...

Klonowanie limfocytów T z odrzuconych alloprzeszczepów ludzkiej nerki. Częstotliwość wzrostu i analiza funkcjonalna / fenotypowa.

Mechanicznie zebrane limfocyty atakujące nieodwracalnie odrzucony ludzki przeszczep allogenny nerki zaszczepiono w warunkach ograniczonego rozcieńczenia w celu obliczenia częstotliwości rosnących prekursorów. Optymalną częstotliwość wzrostu (1/13) uzyskano, gdy transformowane limfocyty B dawcy Epstein-Barr (EBV) zastosowano jako stymulatory (D-BLCL) w obecności interleukiny 2 (IL-2). 55 analizowanych klonów obejmowało wszystkie T11 + i T3 +, a wszystkie eksprymowane antygeny DR (45% stanowiły T8 + i 55% T4 +). Tylko jeden klon mia...

Przeciwciała wywoływane przez antygeny pneumokokowe noszą antygenowy idiotyp.

Istnieją dowody na obecność zarówno mysiego, jak i ludzkiego tocznia, że wytwarzanie przeciwciał anty-DNA może być wywołane przez antygeny środowiskowe. Aby zbadać to dalej, badaliśmy surowicę 10 osób nieautoimmunologicznych immunizowanych wieloważną szczepionką przeciw polisacharydowi pneumokokowemu. Wszystkich 10 pacjentów wykazało wzrost miana przeciwciał przeciwpneumokokowych niosących antybiotyk idiotypowy. Odpowiedź przeciwpneumokokowa była specyficzna, ponieważ nie wykryto żadnych idiotypowych przeciwciał antytę...

Krążące kompleksy immunologiczne i czynnik reumatoidalny immunoglobuliny A u pacjentów z mezangialną immunoglobuliną A nefropatii.

Krążące kompleksy immunologiczne (CIC) zawierające IgA i C3 były podwyższone u 48% pacjentów z nefropatią IgA; IgA1 była dominującą podklasą. IgE1-IgG CIC wykryto w 44%, IgA2-IgG CIC w 7%, a IgM-IgA1 CIC u 16% pacjentów. Nie wykryto CIC IgM-IgA2. Ultrawirowanie z gradientem sacharozy wykazało, że IgG-IgA1 CIC miały przeważnie średnicę pośrednią (13-19S), podczas gdy IgA1-C3 CIC osiadały od 11S do 19S. Przy kwaśnym pH wyizolowany CIC ujawnił obecność znacznych ilości 7S IgA. Jedna trzecia pacjentów miała podwyższony ...

Przeciwciało monoklonalne przeciwko ludzkiej płytkowej glikoproteinie IIIa wykrywa pokrewne białko w hodowanych ludzkich komórkach śródbłonka.

Wcześniej opisywaliśmy serię przeciwciał monoklonalnych przeciwko glikoproteinom błony płytkowej. Dwa z przeciwciał, B59.2 i B2.12, rozpoznają kompleks glikoproteiny IIb-IIIa. Te dwa przeciwciała reagują specyficznie z glikoproteiną (GP) IIIa, co pokazano na podstawie immunoblottingu żelu z dodecylosiarczanem-poliakryloamidowym żelem solubilizowanych błon płytkowych. Monoklonalny B2.12, ale nie B59.2, wiąże się z hodowanymi ludzkimi komórkami śródbłonka uzyskanymi z żyły pępowinowej, tętnicy biodrowej wewnętrznej i ży...

Czynniki genetyczne w metabolizmie lipoprotein. Analiza genetycznego krzyżowania między wsobnymi szczepami myszy NZB / BINJ i SM / J z zastosowaniem kompletnego podejścia do mapy sprzężenia.

Krzyż genetyczny skonstruowano z dwóch rodzicielskich wsobnych szczepów myszy, NZB / BINJ i SM / J, które różnią się znacznie pod względem poziomu lipoprotein w osoczu. Wartości lipidów i apolipoprotein osocza mierzono w 184 potomstwie F2 na normalnej karmie dla dzieci i diecie miażdżycowej. Markery genetyczne były typowane w 126 loci obejmujących wszystkie chromosomy za wyjątkiem Y. Analiza statystyczna ujawniła znaczące powiązanie lub sugestywne połączenie poziomów lipoprotein z markerami na wielu chromosomach. Markery ch...

Powstanie nawrotu białaczki po transplantacji szpiku kostnego wykryte przez polimorfizm długości fragmentów restrykcyjnych.

Przeszczep szpiku kostnego stał się akceptowanym sposobem leczenia ostrej białaczki. Dzięki tej terapii możliwe jest uzyskanie długotrwałego przeżycia wolnego od choroby. Jednak białaczka powtarza się sporadycznie. W większości przypadków nawrót białaczki jest pochodzenia odbiorcy. Było jednak kilka doniesień o rozwoju białaczki w komórkach dawcy. Przypadki te zostały ograniczone do przypadków, w których istnieje łatwa do zidentyfikowania różnica lub anomalie chromosomów, zwykle chromosom płci. W niniejszym artykule op...

Wykorzystanie hodowanych ludzkich komórek limfoidalnych do wykrywania uczulenia humoralnego u potencjalnych biorców przeszczepów nerek.

Potencjalni biorcy przeszczepów nerki byli testowani pod kątem limfocytotoksyczności; z nich wybraliśmy 102 surowice pozbawione przeciwciał cytotoksycznych przeciwko limfocytom obwodowym z co najmniej 80 niespokrewnionych osób. W celu wykrycia uczulenia humoralnego, poddaliśmy je reakcji z 17 hodowanymi ludzkimi limfocytowymi liniami komórkowymi mającymi różne fenotypy HL-A. Przeciwciała cytotoksyczne reagujące z tymi hodowanymi komórkami zostały teraz wykryte w niektórych surowicach. Przeciwciała te nie były skierowane przeciw...

Utlenianie określonej metioniny w trombomodulinie przez aktywowane produkty neutrofili blokuje aktywność kofaktora. Potencjalny szybki mechanizm modulacji krzepnięcia.

Trombomodulina śródbłonka (TM) odgrywa kluczową rolę w hemostazie jako kofaktor do zależnego od trombiny tworzenia aktywowanego białka C, silnego antykoagulanta. Chloramina T, H2O2 lub kwas podchlorynowy wytworzony z H2O2 przez mieloperoksydazę szybko niszczą 75-90% aktywności kofaktora TM. Aktywowany PMN, pierwotne źródło biologicznych utleniaczy in vivo, również szybko dezaktywuje TM. Utlenianie TM przez PMN jest hamowane przez difenylenodjodon, inhibitor oksydazy NADPH. Zarówno Met291 jak i Met388 w sześciu domenach powtórze...

Obecność antygenu nie będącego HLA B w pacjentach z gorączką reumatyczną i ich rodzinami określonymi przez przeciwciało monoklonalne.

Wielu badaczy podejrzewało, że istnieje genetyczna predyspozycja do gorączki reumatycznej (RF). W tym kontekście opracowaliśmy ostatnio serię przeciwciał monoklonalnych skierowanych przeciwko komórkom B otrzymanym od pacjentów z RF, z których jeden, oznaczony D8 / 17, identyfikuje antygen komórek B obecny u 100% wszystkich badanych pacjentów z RF. Podczas gdy najwyższy odsetek komórek pozytywnych był eksponowany przez probioty RF (33,5% +/- SE), odsetek komórek nienarażonego rodzeństwa i rodziców wynosił odpowiednio 14,6 i 13...

Zapalenie stawów wywołane u szczurów przez klonowane limfocyty T reagujące na prątki, ale nie na kolagen typu II.

Badaliśmy patogenezę adiuwantowego zapalenia stawów u szczurów, stosując długotrwałą linię komórkową limfocytów T, linię A2, która może wywoływać zapalenie wielostawowe i może być również stosowana do szczepienia szczurów przeciw adiuwantowemu zapaleniu stawów. Chociaż linia A2 została wybrana ze względu na swoją odpowiedź proliferacyjną na prątki, reagowała również na kolagen typu II. Aby wyjaśnić jego rolę w odpowiedzi na kolagen typu II i związek między artretogennością a szczepieniem, sklonowaliśmy A2...

Kompletna komplementarna sekwencja aminokwasowa DNA psiego fosfolambu serca.

Komplementarne klony DNA (cDNA) specyficzne dla fosfolambu sarkoplazmatycznych błon retikulum wyizolowano z biblioteki cDNA serca psa. Sekwencja aminokwasowa wywnioskowana z sekwencji cDNA wskazuje, że fosfolamban składa się z 52 reszt aminokwasowych i nie ma sekwencji sygnałowej na końcu aminowym. Białko ma sugerowany ciężar cząsteczkowy 6080, który jest zgodny z jego pozorną monomeryczną masą cząsteczkową 6000, oszacowaną uprzednio przez elektroforezę na żelu z dodecylosiarczanem-poliakryloamidem. Fosfolamban zawiera dwie r...

Podzbiór naturalnych komórek zabójczych jest indukowany przez kompleksy immunologiczne w celu wyświetlenia receptorów Fc dla IgE i IgA i wykazuje funkcję regulacji izotypowej.

Badano ekspresję receptorów Fc dla IgE (FcER) lub IgA (FcAR) na oczyszczonych komórkach NK (NK). Nie wykryto FcER + i kilku komórek NK FcAR + na świeżo rozdzielonych komórkach NK (NKH-1 +) od zdrowych dawców. Inkubacja komórek NK kompleksami immunologicznymi IgE-anty-IgE lub kompleksami immunologicznymi IgA-anty-IgA indukowała odpowiednio do 10 i 20% komórek FcER + lub FcAR +. Te FcR indukowano na CD3-, ale nie na komórkach CD3 + NKH-1 +. W przeciwieństwie do tego, komórki NK od pacjentów z różnymi dysgammaglobulinemiami nie mog...

Dowód, że glikoproteina o masie cząsteczkowej 210 000 (GP 210) służy jako płytkowy receptor Fc.

Wcześniej zidentyfikowaliśmy glikoproteinę płytkową o wielkości 210 000 moli (GP 210), która nie występuje w płytkach Bernard-Soulier, i stwierdziła, że przeciwciało przeciwko GP 210 hamuje wywołaną ristocetyną aglutynację płytek krwi. Pokazujemy teraz przez immunoblot, że GP 210 wiąże sprzężone cieplnie królicze i ludzkie IgG, jak również hemocyjaninę skałoczepu (KLH) -anti-KLH i kompleksy odpornościowe ovalbumin (OA) -anti-OA. Wiązanie kompleksu immunologicznego z GP 210 było zachowane na płytkach potraktowanych ...

Autoimmunologiczne limfocyty T w myasthenia gravis. Określanie docelowych epitopów przy użyciu linii T i rekombinowanych produktów mysiego nikotynowego genu receptora acetylocholinowego.

Oligoklonalne i sklonowane linie T z krwi obwodowej lub grasicy chorych z myasthenia gravis (MG) wybrano do reaktywności wobec nikotynowych receptorów acetylocholinowych (AChR) z Torpedo california lub przeciwko rekombinowanemu peptydowi fuzyjnemu, X4, reprezentując zewnątrzkomórkową część mysiego AChR. łańcuch alfa. Wszystkie linie komórkowe wyrażały fenotyp błony komórkowej CD4, a ich reaktywność antygenowa była blokowana przez przeciwciała przeciwko monomorficznym determinantom HLA DR / DP. Używając panelu białek fuzyjn...

Hamujące działanie met-enkefaliny na uwalnianie ACTH u człowieka.

W celu zbadania mechanizmu działania met-enkefaliny (FK 33824) na oś przysadkowo-nadnerczową, ośmiu normalnych ochotników płci męskiej poddano testowi stymulacji ACTH. Lizine-vasopressing (LVP), 5 IU, wstrzykiwano domięśniowo po wstępnym traktowaniu 0,5 mg FK 33824 im lub placebo. U sześciu pacjentów ponownie podawano opiaty przed pojedynczym wstrzyknięciem 0,25 mg ACTH. W regularnych odstępach czasu zbierano próbki beta 1-24 im Blood, a stężenia ACTH i kortyzolu analizowano we wszystkich próbkach. LVP indukował znaczący ACTH...

Antysensowne oligonukleotydy interleukiny-6 hamują wzrost ludzkich linii komórek szpiczaka.

Wykazano, że IL-6 jest czynnikiem wzrostu plazmocytomy u myszy i uważa się, że odgrywa ona kluczową rolę w rozwoju ludzkiego szpiczaka mnogiego. Zbadaliśmy wymagania IL-6 dla wzrostu dwóch ludzkich linii komórek szpiczaka, U266 i RPMI 8226. Te linie komórkowe wydzielały niewielkie ilości IL-6 (20 U / ml) i zawierały mRNA IL-6. Receptory IL-6 były wykrywalne na powierzchni komórek złośliwych za pomocą immunofluorescencji. Przeciwciała przeciwko IL-6 nie zmieniały proliferacji tych komórek szpiczaka. Zmniejszenie zależne od d...

Identyfikacja 16 600-daltonowego białka błony na nietypowym Haemophilus influenzae jako celu dla bakteriobójczego przeciwciała surowicy ludzkiej.

Białko błony zewnętrznej 16 600-D jest obecne we wszystkich szczepach Haemophilus influenzae, a przeciwciała przeciwko temu białku są obecne w ludzkiej surowicy. Badanie to zaprojektowano w celu oceny roli tego białka błony zewnętrznej (P6) w nietypowych H. influenzae jako celu dla bakteriobójczego przeciwciała surowicy ludzkiej. P6 wyizolowano i połączono z kolumną powinowactwa. Zubażanie normalnej ludzkiej surowicy przeciwciał przeciwko P6 za pomocą chromatografii powinowactwa skutkowało zmniejszoną aktywnością bakteriobó...

Cukrzyca i seksualny karłowatość ateliotyczna: badanie porównawcze

Częstość występowania retinopatii cukrzycowej określono u 38 chorych na cukrzycę i 31 seksualnych atelektycznych karłów z niedoborem hormonu wzrostu (HGH). Rozkład wieku i płci był w przybliżeniu taki sam w każdej grupie. Częstość występowania i wzorzec nietolerancji glukozy były podobne u diabetyków i krasnoludów z niedoborem HGH. Większość diabetyków (21 z 38) i niedoborów HGH (26 z 31) wykazywało insulinoopenię po glukozie, mieszane posiłki z wołowiny glukozowej i napar z l-argininy. Mniejsza liczba krasnoludów z...

Zmieniona ekspresja receptora C3b erytrocytu, kompleksy immunologiczne i aktywacja dopełniacza u homoseksualnych mężczyzn w różnych grupach ryzyka dla nabytego zespołu niedoboru odporności.

Badaliśmy poziomy receptorów erytrocytarnych C3b (E-CR1) i skorelowaliśmy je z poziomem krążących kompleksów immunologicznych (CIC) i aktywacją dopełniacza u pacjentów z ryzykiem zespołu nabytego niedoboru odporności (AIDS). Znaczącą redukcję stwierdzono u pacjentów z AIDS (185 +/- 93 CR1 / komórkę), zespołem związanym z AIDS i uogólnioną limfadenopatią, podczas gdy zdrowi homoseksualiści lub normalni kontrolerzy mieli 434 +/- 193 i 509 +/- 140 CR1 / komórka, odpowiednio (P mniej niż 0,001). Badania rodzinne wskazują, ...

Hemoglobina NYU, wariant z łańcuchem delta,? 2? 212Lys

Niewielki składnik hemoglobiny (Hb) o właściwościach elektroforetycznych łańcucha a-wariantu Hb A2? napotkano w dwóch niepowiązanych rodzinach pochodzenia rosyjsko-żydowskiego. Ten niewielki składnik, oznaczony jako Hb NYU, okazał się wynikać z substytucji lizyny dla asparaginy przy a12. Potwierdziliśmy badania innych na temat hemoglobiny A2? wyizolowany z hemoglobiny niektórych afrykańskich osobników, wynika z zastąpienia normalnej glicyny w pozycji 16 przez argininę. Tak więc dla interpretacji częstości występowania wari...

Zwiększone ilości poliamin mogą obniżyć produkcję interleukiny 2 w reumatoidalnym zapaleniu stawów.

Poliaminy zmniejszają reaktywność immunologiczną. RA jest związane ze zmniejszoną produkcją IL 2. W tym badaniu przedstawiamy dowody sugerujące, że nadmierne poliaminy mogą przyczyniać się do niedoboru IL 2 w RA. Blokowanie wytwarzania poliaminy za pomocą inhibitorów dekarboksylazy ornityny prowadzi do zwiększonej produkcji IL 2 przez PBMC RA. Ponadto, inhibitory oksydazy poliaminowej (PAO) i katalazy również zwiększają wytwarzanie IL 2 przez PBMC RA. Ten efekt hamowania PAO jest zależny od monocytów. Po 3 dniach hodowli, PB...

Związki witaminy D. Wpływ na klonalną proliferację i różnicowanie ludzkich komórek szpikowych.

Zbadaliśmy wpływ 1 alfa, 25-dihydroksywitaminy D3 (1 alfa, 25 (OH) 2D3) i różnych analogów witaminy D na proliferację i różnicowanie normalnych i białaczkowych komórek kolonijnych mieloidalnych. Tylko komórki z linii białaczkowych szpiku, które zawierały względnie dojrzałe komórki (HL-60, U937, THP, HEL, M1) zostały zaindukowane w celu różnicowania i były hamowane w ich klonalnym rozwoju poprzez ekspozycję na 1 alfa, 25 (OH) 2D3 (50% hamowania 3 X 10 (-8) -8 X 10 (-10) M). Fluorowany analog witaminy D był 5-10-krotnie siln...

Interakcja między Borrelia burgdorferi a śródbłonkiem in vitro.

Podczas patogenezy choroby z Lyme, Borrelia burgdorferi rozprzestrzenia się hematogennie od miejsca ukąszenia przez kleszcza do kilku tkanek w całym organizmie. Specyficzny mechanizm emigracji krętków jest obecnie nieznany. Stosując hodowane komórki śródbłonka żyły ludzkiej pępowiny, stwierdziliśmy, że Borrelia burgdorferi wiąże się z komórkami śródbłonka i macierzą podśródbłonkową. Izolaty o niskim pasażowaniu są 22-30 razy większe niż szczepy utrzymywane w hodowli w sposób ciągły. Wiązanie krętka z macierzą...

Hiperkalcemia wywołana arotynoidem u szczurów poddanych thyroparathyroidectomized. Nowy model do badania resorpcji kości in vivo.

Model stymulowanej resorpcji kości opracowano przy użyciu syntetycznego retinoidu u szczurów poddanych thyroparathyroidectomized. Retinoidy spowodowały wzrost resorpcji kości i liczbę kręgowych osteoklastów podokostnowych. Wynikowy wzrost stężenia Ca w osoczu można wykorzystać jako łatwo mierzony wskaźnik resorpcji kości. Trzy bisfosfoniany powodowały zależne od dawki zapobieganie i odwracanie hiperkalcemii wywołanej retinoidami. Ich moc była podobna do poprzednio uzyskiwanej przez histomorfometrię. Napromieniowanie (600 rad)...

Rola pleocytozy płynu mózgowo-rdzeniowego i kapsułki Haemophilus influenzae typu b na przepuszczalność bariery krew-mózg podczas doświadczalnego zapalenia opon mózgowych u szczurów.

Wpływ leukocytów i kapsułki Haemophilus influenzae typu b (Hib) na przepuszczalność bariery krew-mózg (BBBP) na krążącą albuminę 125I u szczurów normalnych i leukopenicznych oceniano po wewnątrzczaszkowym zaszczepieniu kapsułkowanych (Rd- / b + / 02) lub bez kapsułek (Rd). - / b- / 02) izogeniczne szczepy Hib. Zarówno zwierzęta normalne jak i leukopeniczne zwiększyły BBBP 18 godz. Po inokulacji, przy normalnych szczurach wykazujących znacząco zwiększone BBBP po prowokacji zakapsułowanym szczepem. Pomimo pleocytozy płynu m...

Amplifikacja zmienionych samoreaktywnych odpowiedzi limfocytów T cytopla-tycznych przez klonowane, allospecyficzne ludzkie komórki Th.

Badano wpływ klonowanej allospecyficznej ludzkiej komórki Th, zwanej 86, na wytwarzanie in vitro zmienionych autoreaktywnych cytolitycznych limfocytów T (CTL). Wykorzystując indukcję zmienionej haptenowo autoreaktywnej CTL jako modelu dla odporności komórkowej zależnej od guza lub nowotworu, ustaliliśmy, że obecność niewielkiej liczby komórek klonu 86 znacznie zwiększyła wytwarzanie zmodyfikowanych haptenowo autoreaktywnych CTL. Komórki zabójcze indukowane należą do podgrupy CD4-, CD8 +, są specyficzne dla autologicznych stym...

Tłumaczenie i stabilność mRNA ludzkiej globiny w oocytach Xenopus.

Ludzki matrycowy RNA (mRNA) przygotowany z komórek erytroidalnych pacjentów z niedokrwistością sierpowatych komórek został przetłumaczony na oocyty Xenopus laevis. Dodanie heminy do wstrzykniętego mRNA powoduje wzrost całkowitej syntezy globiny i stosunek alfa do syntezy beta-globiny (stosunek alfa / beta) do zbliżenia się do jedności. Aby określić wpływ długości segmentu poli (A) na stabilność mRNA ludzkiej globiny, mRNA 10S globiny frakcjonowano na frakcje poli (A) -pochodne przez chromatografię kolumnową oligo (dT) -celel...

Publiczna determinanta antygenowa w rodzinie cząsteczek HLA-B.

Serologiczna reaktywność krzyżowa między allelowymi produktami genowymi zwykle występuje w kompleksie HLA, ale podstawa molekularna tych zjawisk serologicznych jest niecałkowicie scharakteryzowana. Ze względu na silną reaktywność krzyżową między antygenami zawierającymi grupę reaktywną krzyżowo B7 (tj. HLA-B7, Bw22, B27, B40 i Bw42) oraz z powodu połączenia kilku antygenów z tej grupy z spondyloartropatią, rozpoczęliśmy badanie chemiczna podstawa reaktywności krzyżowej wśród tej grupy antygenów. Korzystając z klasycz...

Czynnik aktywujący płytki krwi: mediator trzeciej ścieżki agregacji płytek? Badanie u trzech pacjentów z niedoborem syntezy czynnika płytkowego.

Agregaty płytek trombiny, kolagenu i Ca2 +-A23187 w obecności inhibitorów pierwszego (zależnego od ADP) i drugiego (zależnego od cyklooksygenazy) szlaku aktywacji płytek krwi. Tej agregacji za pośrednictwem trzeciego szlaku postawiono hipotezę, że pośredniczy w niej czynnik aktywujący płytki tłuszczowej alkoksyeteru (PAF). Niedawno wykazaliśmy brak obecności lipidów alkoksyeteru typu plazmidowego i niedobór kluczowych enzymów ich biosyntezy u pacjentów Zellweger. Postawiliśmy hipotezę, że synteza PAF może również zostać...

Przedsionkowy peptyd natriuretyczny chroni przed ostrą niedokrwienną niewydolnością nerek u szczurów.

Ze względu na jego zdolność do zwiększania przesączania kłębuszkowego, antagonizowania działania czynników zwężających naczynia i wytwarzania rozszerzenia naczyń, alfa-ludzki przedsionkowy peptyd natriuretyczny (alfa-hANP) oceniano pod kątem jego potencjalnie korzystnych skutków w doświadczalnej niedokrwiennej niewydolności nerek wywoływanej przez 45-60 minut tętnicy nerkowej okluzja u szczurów Sprague-Dawley obustronnie lub jednostronnie nienaruszonych. Po niedokrwieniu, 4-godzinny wlew dopełniacza alfa-hANP przywrócił kl...

Interferon-gamma przezwycięża glukokortykoidową supresję biosyntezy kachektyna / czynnik martwicy nowotworu przez mysie makrofagi.

Glukokortykoidy prawie całkowicie hamują syntezę przez wyizolowane makrofagi czynnika martwicy nowotworu / TNF (ang. Cachectin / tumor necrosis factor), cytokiny będącej głównym endogennym mediatorem wstrząsu septycznego. Pomimo tej skuteczności in vitro kliniczne zastosowanie glukokortykoidów nie przyniosło żadnych wyraźnych korzyści w leczeniu wstrząsu septycznego. Aby zrozumieć, jakie inne mechanizmy mogą odgrywać rolę u pacjenta z posocznicą, zbadaliśmy wpływ interferonu gamma (IFN gamma) na syntezę cachectin / TNF. Po...

Specyficzne wiązanie antygenu z ludzkimi limfocytami T.

Wykazano, że ludzkie limfocyty T uczulone na Candida albicans (CA) proliferują w hodowlach indukowanych mannanem, rozgałęzionym polisacharydem ekstrahowanym ze studzienki komórkowej CA. Obecnie opisujemy, że gdy używano silnie znakowanego [3H] mannanu, specyficzne dla antygenu komórki T były zdolne do wiązania znakowanego mannanu na ich błonie. Obserwacje, że nieistotne komórki blastyczne nie wiązały [3H] mannanu i że specyficzne dla mannanu komórki blastyczne nie wiązały się z trytowanym pneumokokowym polisacharydem SIII, ws...

1,25-Dihydroksywitamina D3 zwiększa regulację szlaku sygnalizacji fosfatydyloinozytolu w ludzkich keratynocytach poprzez zwiększenie poziomów fosfolipazy C.

1,25-dihydroksywitamina D3 (1,25 (OH) 2D3) indukuje różnicowanie normalnych ludzkich keratynocytów, częściowo przez zwiększenie ich podstawowego wewnątrzkomórkowego poziomu wapnia (Cai) w ciągu kilku godzin. Agoniści, tacy jak ATP działający poprzez receptory błonowe, powodują natychmiastowy, ale przejściowy wzrost Cai, któremu towarzyszy wzrost trójsifosforanu inozytolu (IP3). Leczenie keratynocytów przez 24 hz 1 nM 1,25 (OH) 2D3 dało dwu- do czterokrotne wzmocnienie odpowiedzi Cai tych komórek na ATP. Wzmocnienie to było h...

Izolacja i częściowa charakterystyka białek wiążących Fc gamma ludzkich leukocytów.

Wyizolowaliśmy i częściowo scharakteryzowaliśmy trzy makrocząsteczki wiążące Fc z ludzkich leukocytów. Jednojądrzaste komórki od zdrowych osób i od pięciu pacjentów z przewlekłą białaczką limfocytową i neutrofilami od zdrowych dawców były znakowane izotopowo za pomocą 125I i laktoperoksydazy. Po solubilizacji komórek przez detergent makrocząsteczki wiążące gamma Fc oczyszczono za pomocą powtarzalnej chromatografii powinowactwa w różnych warunkach i analizowano za pomocą elektroforezy na żelu poliakryloamidowym z d...

Cyklosporyna a. Hamowanie eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej u szczurów Lewisa.

Opisano tu cyklosporynę A (CS-A), selektywny inhibitor limfocytów T, aby zapobiec zapaleniu naczyniówki wywołanemu antygenem S (S-Ag) u szczurów Lewisa. S-Ag, występujący we wszystkich siatkówkach ssaków, wykazuje właściwości bodźcowopodobnych w warunkach eksperymentalnych, a pacjenci z pewnymi jednostkami uoditycznymi wykazują odpowiedzi komórkowe na ten antygen. Codzienne leczenie CS-A (10 mg / kg) rozpoczęło się w tym samym dniu, w którym immunizacja S-Ag całkowicie hamowała rozwój zapalenia błony naczyniowej w tym doś...

Charakterystyka mutacji punktowych w tym samym kodonie argininy u trzech niespokrewnionych pacjentów z niedoborem trankarbamylazy ornityny.

Mutacje punktowe w genie O-karnityniny sprzężonej z X zostały wykryte w tym samym miejscu restrykcyjnym Taq I w 3 z 24 niepowiązanych probandów z niedoborem OTC. Mutację de novo można prześledzić we wszystkich trzech rodzinach u osobnika w poprzednim pokoleniu, potwierdzając niezależny nawrót. Sekwencję DNA w regionie zmienionego miejsca Taq I określono w trzech probandach. W dwóch niepowiązanych męskich probandach z noworodkowym wystąpieniem ciężkiego niedoboru OTC wykryto mutację guaniny (G) do adeniny (A) na nici sensowne...

Rola centralnych adrenoceptorów alfa-1 w narkolepsji psów.

Rola centralnych receptorów adrenergicznych alfa-1 w katapleksji została zbadana u genetycznie narkoleptycznych pinczerów Dobermana. Leczenie narkoleptycznych psów za pomocą 25-600 mikrogramów / kg prazosyny, selektywnego blokera receptora alfa-1 adrenergicznego, zaostrzało katapleksję, podczas gdy leczenie agonistą alfa-1, metoksaminą, łagodziło go. Kolejne badania wykazały, że korzystny wpływ klasycznego leczenia narkolepsji u ludzi (amfetaminy i trójcykliczne leki przeciwdepresyjne) jest antagonizowany przez prazosin, co suger...